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產(chǎn)品中心細(xì)胞培養(yǎng)試劑550583BD Pharmingen白細(xì)胞活化混合物試劑
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BD Pharmingen白細(xì)胞活化混合物試劑通過(guò)細(xì)胞內(nèi)染色檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞內(nèi)積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細(xì)胞群以誘導(dǎo)產(chǎn)生目標(biāo)細(xì)胞因子。如果沒(méi)有在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑存在下培養(yǎng)的適當(dāng)激活的產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞，在大多數(shù)情況下檢測(cè)細(xì)胞因子細(xì)胞內(nèi)積累的能力會(huì)受到嚴(yán)重?fù)p害。據(jù)報(bào)道，刺激細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的各種體外方法。多克隆激活劑對(duì)于誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞特別有用。這些激活劑包括：伴刀豆球蛋白 A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌腸毒素 B 和針對(duì) TCR/CD3 復(fù)合物亞基的單克隆抗體（有或沒(méi)有針對(duì)共刺激受體的抗體，如 CD28）。
含BD Pharmingen白細(xì)胞活化混合物試劑是一種即用型多克隆細(xì)胞活化混合物，含有佛波酯、PMA（佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯）、鈣離子載體（離子霉素）和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 BD GolgiPlug™ （Brefeldin A）。這種混合物可用于從 T 細(xì)胞引發(fā)原發(fā)性細(xì)胞因子反應(yīng)。使用這種混合物刺激細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞因子產(chǎn)生，細(xì)胞因子位于產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。細(xì)胞因子的這種定位是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑成分 Brefeldin A 引起的，它阻斷了細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。因此，細(xì)胞中細(xì)胞因子蛋白水平積累的增加增強(qiáng)了免疫熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)分析對(duì)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞的可檢測(cè)性。每 100 μL 樣品瓶的內(nèi)容物足以處理多達(dá) 50 mL 的細(xì)胞培養(yǎng)物（~10^6 個(gè)細(xì)胞/mL）;因此可以刺激 ≥ 5 × 10^7 個(gè)細(xì)胞。
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